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血清的化凍、滅活與分裝

更新時間:2012-11-07點擊次數(shù):381

1、化凍

將血清(FetalBovineSerum,Hyclone)從-20℃冰箱取出,放于4℃冰箱化凍過夜;也可室溫(或浸于自來水中)化凍,化凍后若不馬上滅活,可以放入4℃冰箱暫時保存;

2、滅活

①放入室溫的水浴鍋內(nèi)開始加熱(同時放入一個內(nèi)裝200ml自來水的血清瓶,插入一根溫度計,溫度監(jiān)控以此為準(zhǔn));

②當(dāng)溫度計顯示56℃時,控制在此溫度30分鐘±3分鐘;若不小心使溫度上升超過56℃,則:若仍未超過60℃,且時間很短(比如:不超過5分鐘),則仍可使用;若超過60℃,或者時間較長,則棄去不用,或者嘗試用于ME細胞的培養(yǎng);

③取出,自然冷卻至室溫(約需1-3小時),可分裝或-20℃繼續(xù)凍存。

3、分裝

①轉(zhuǎn)入細胞間,用移液器將血清分裝,注意預(yù)先要將血清輕輕搖動數(shù)周、混勻;

②吹出血清時要注意:不要吹出氣泡(血清很粘稠,很容易產(chǎn)生氣泡;如果已產(chǎn)生氣泡,則在酒精燈火焰上過一下);標(biāo)好批號和日期;

③放入-20℃冰箱凍存(分裝一次大約可以使用1—2個月)。



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