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干細(xì)胞培養(yǎng)步驟

更新時間:2012-10-18點擊次數(shù):306

1、擴(kuò)增:不同的干細(xì)胞,其擴(kuò)增方法不同。如造血干細(xì)胞為懸浮培養(yǎng),而腫瘤干細(xì)胞則為貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞。

2、消化:根據(jù)細(xì)胞耐受性的不同,有多種方法,如機(jī)械法,化學(xué)法,以及膠原酶、胰酶消化等不同方法。

3、凍存:取處于對數(shù)期的干細(xì)胞,消化,并吹打為單細(xì)胞懸液,用2X培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,將等體積DMSO逐滴加入細(xì)胞懸液中,輕輕吹打混勻,重懸細(xì)胞于凍存管中,并置于凍存盒中,凍存盒放入-80℃冰箱。

4、分化:鑒定干細(xì)胞的一項重要指標(biāo)就是它的分化能力。一般分化采取加入細(xì)胞因子誘導(dǎo)、共培養(yǎng)、小分子刺激等方法。


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